实验动物的给法
(一)注she给药法
1. 皮射 注she时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤,右手持将针头刺入,固定后即可进行注射。一般小鼠在背部或前肢腋下,大鼠在背部或侧下腹部;豚鼠在后大腿内侧、背部等脂肪少的部位;兔在背部或耳根部注she;蛙可在脊背部淋巴囊注射;应用该法,可以待动物恢复健康后,在动物清醒状态下反复采集胃液。狗多在大腿外侧注she,拔针时,轻按片刻,防药液逸出。
2. 皮内注she 此法用于观察皮肤血管的通透性变化或观察皮内反应。 如将一定量的性同位素溶液、颜料或致炎物质、等注入皮内,观察其消失速度和局部血液循环变化,作为皮肤血管通透性观察指标之一。方法是:将动物注射部位的毛剪去,消毒后,用皮试针头紧贴皮肤皮层刺入皮内,然后使针头向上挑起并再稍刺入,即可注射药液。注射后可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。直接抽取法在急性实验中,可用吸管直接插入动物口腔或唾液腺导管抽吸唾液,此法非常简单,但从口腔抽吸唾液会有杂质混入。
3. 肌肉注she 当给动物注she不溶于水而混悬于油或其他溶剂中的时,常采用肌肉注she。肌肉注she一般选用肌肉发达、无大血管经过的部位,多选臀部。
注she时针头要垂直快速刺入肌肉,如无回血现象即可注she。给大、小鼠作肌肉注she时,选大腿外侧肌肉进行注she。
4. 腹腔注she 先将动物固定,腹部用酒精棉球擦试消毒,然后在左或右侧腹部将针头刺入皮下,沿皮下向前推进约0.5厘米,再使针头与皮肤呈45 度角方向穿过腹肌刺入腹腔,此时有落空感,回抽无肠液、尿液后,缓缓推入药液。此法大小鼠用的较多。
5. 静脉注she 是将药液直接注she于静脉管内,使其随着血液分布全身,迅速奏效。但排泄较快,作用时间较短。
小鼠、大鼠的静脉注she:常采用尾静脉注she。鼠尾静脉共有3根, 左右两侧和背侧各1根,两侧尾静脉比较容易固定,故常被采用。操作时,先将动物固定在暴露尾部的固定器内(可用烧杯、铁丝罩或粗试管等物代替),用75%酒精棉球反复擦试使血管扩张, 并可使表皮角质软化,以左手拇指和食指捏住鼠尾两侧,使静脉充盈,注she时针头尽量采取与尾部平行的角度进针。一般的条件要求是接近于人、容易管理和能够大量使用的,因此多用哺乳类的兔、大黑鼠、小白鼠、豚鼠、猫、狗、猴、田鼠等。
根据GB19489-2004实验室 生物 安全通用要求,动物实验室的 生物 安全要点:
动物实验室的生物安全防护设施应参照BSL1-4实验室的要求,还应考虑对动物呼吸、排泄、毛发、抓咬、挣扎、逃逸、动物实验(如染毒、医学检查、取样、解剖、检验等)、动物饲养、动物及排泄物的处置等过程产生的潜在生物危害的防护。应特别注意对动物源性气溶胶的防护,例如对动物的剖检应在负压剖检台上进行。前lie腺素E2对大鼠巨噬细胞株NR8383合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响方法:分别采用0。
应根据动物的种类、身体大小、生活习性、实验目的等选择具适当防护水平的、于动物的、符合国家相关标准的 生物安全柜 、动物饲养设施、动物实验设施、消毒设施和清洗设施等。
实验室建筑应确保实验动物不能逃逸,非实验室动物(如野鼠、昆虫等)不能进入。实验室设计(如空间、进出通道等)应符合所用动物的需要。
动物实验室空气不应循环。动物源气溶胶应经适当的过滤/消毒后排出,不能进入室内循环。
如动物需要饮用无菌水,供水系统应可安全消毒。
动物实验室内的温度、湿度、照度、噪声、洁净度等饲养环境应符合国家相关标准的要求。
脑卒中模型大鼠
方法:SD大鼠,雌雄不拘,体重为250〜300g,经腹腔注she水合氯醛(350〜400 mg/kg体重的剂或戊ba比妥钠(50〜60 mg/kg体重的剂量)ma醉后,仰卧位固定,剃除颈部毛发,手术区域皮肤常规消毒。颈前正中切口,分离双侧颈总动脉(CCA),套线备用。同时枕部切口,借助手术显微镜分离暴露di一颈椎横突翼并找左右横突孔,将灼热的电烙铁尖头接插入翼突孔,深度以2~3 mm为宜,电凝双侧椎动脉(vertebral artery,VA)造成永jiu性闭塞,插入时间不宜过长,1〜2s即可,避免造成局部产热过髙而损伤脊髄和脑干。24 h后用yi醚浅麻zui大鼠,颈部常规消毒,打开颈前正中切口,将套在双侧颈总动脉下的备用线结扎,根据实验需要可阻断血流10〜60 min。松开结扎线后可实行再灌注研究。结果:随着NR8383细胞培养液中加入PGE2浓度增gao,其VEGF蛋白表达和VEGFmRNA的表达水平显著升高(P<。膀胱原位癌模型方法
分组及处理雌性C57BL/6小鼠150只,随机.分成A(膀胱粘膜未预处理组).B(膀胱粘膜预处理表浅模型观察组),C(膀胱粘膜预处理丝lie霉su治liao组)、D(膀胱粘膜预处理PBSzhi疗对照组)和E(膀胱粘膜预处理不zhi疗生存期观察组)5组,每组30只。在灌注MB49膀胱ai细胞前,其中A组不进行预处理,B、C、D和E组则对膀胱粘膜进行预处理。在灌注MB49膀胱ai细胞后,A组不作任何处理;B组在灌注后第7天始每隔3d处死3只解剖观察膀胱肿liu生长情况及有无转移,并取qi官组织(膀胱、shen、输尿管.心、肝、肺、脾)做病理切片(HE和免yi组化染色);C组在灌注后di1天开始给予si裂mei素(0.05 mg/ml)0.1 m'膀胱灌注zhi疗,每隔3d1次,连续6次;D组灌注后di1天开始给予PBS膀胱灌注,每隔3dl次,连续6次;E组不作处理。所有小鼠观察- - 般情况(精神状态、饮食、体质量等)zhong瘤生长情况(是否成瘤.肿liu大小.有无血尿、远处转移等)和生存期,并对si亡小鼠进行解剖,留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定(C.D组小鼠膀胱固定前称重)。相反,大小白鼠、地鼠和豚鼠结扎冠脉的后果就比较稳定一致,可以预测,因而可以标准化。灌注后第60天,处死A.C.D和E组未si亡小鼠,解剖并留取膀胱.shen、输尿管、心、肝、肺、脾等组织用4%福er马林固定,C、D.E组小鼠膀胱固定前称质量,
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