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PCR实验室建设的几个关键点:
(1)平面布局:不论是组合式还是分散式布置的PCR实验室,各功能房间均宜设置独立缓冲间
(2)区域空气流向:为避免互相污染,PCR实验室空气流向必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
(3)通风空调:为避免交叉污染,各功能用房内空气不能掺混。混合式PCR实验室应采用新风直流空调系统,当采用新风系统有困难时,各区域的空气只能在自己的房间内循环。
(4)生物安全:按照实验室生物安全指南(第二版)的规定,2019-nCoV病原体暂按照第二类病原微生物进行管理,则样本植被区宜为负压或加强型P2实验室,核酸操作应在生物安全柜内进行。
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PCR实验室为什么要进行三区隔离?常见的三区是指:
1、试剂配制区:PCR反应体系的配制区域。
2、标本处理区:包括扩增模板的制备,即提取DNA的地方。
3、PCR扩增和产物分析区:进行PCR扩增的区域,也是扩增产物进行凝胶电泳分析的区域。
如果将PCR扩增区域和产物分析区再次分开,就是四区隔离。四区隔离,主要目的是防止气溶胶在各个PCR区域之间的流动,好的方法是每个区域隔一幢楼,但操作起来不现实,于是便有了针对不同区域设置正负压的方法。
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PCR实验室设计建设标准规范
PCR实验室的平面布局
原则上,PCR实验室被划分为4个独立的工作区,并严格将其分开。实验物料、试剂、记录笔、纸、清洁物料等只能从扩增前区流向扩增后区,也就是从试剂制备区→样品制备区→扩增区→扩增产物分析区,不能反向流动。实验室气流也应从扩增前区流动到扩后区,并且不能反向。
每个工作区域都要设置一个缓冲间,并在两者之间设置一个联锁装置。核酸检查工作区的不同功能应分开,且应有明显标志,各工作区之间不能相通。各区域如果紧密相连,则需要安装物品传递窗。每一个工作区域的顶部都应该安装一个波长为254nm的紫外灯。
实验室较为理想的布局模式为有一个走廊,试剂制备区、样品制备区、扩增区和扩增产物分析区要非常规范地排列在一起。实验室内部区域应设为正压或常压状态,缓冲室内部设为负压状态,以便空气从实验室内部向外流动,缓冲室内通向实验室和走廊的门设置联锁装置,当一扇门打开时,另一扇门必须关闭,防止出现两扇门同时打开的情况。
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