yao物对细胞的IC50检测
IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一yao物或者物质(yi制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质,比如酶,细胞受体或是微生物)的半量。)4、MDC(Monodansylcadaverine,单丹磺酰尸胺)染色:包括自噬体,所有酸性液泡都被染色,故属于非特异性的。在凋亡方面,可以理解为一定浓度的某种药wu诱导肿liu细胞凋亡50%,该浓度称为50%抑制浓度,即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度,IC50值可以用来衡量yao物诱导凋亡的能力,即诱导能力越强,该数值越低,当然也可以反向说明某种细胞对yao物的耐受程度。
Q:中可能出现的沉淀物是什么?
A:基于多年的实验研究,用于细胞培养的胎牛以及其它中可能会存在以下种类的沉淀物:
(1)纤维蛋白,它是经常出现的较大的沉淀物,可以达到 1-2mm,可以用肉眼观察到。7%两个浓度的低溶点琼脂糖液,高压灭菌后,维持在40日中不会凝固。因为都是在低温下进行收集和快速处理的,一些纤维蛋白原(可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体)在处理过程中仍然处于溶解状态,当经过的过滤分装后,就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。
(2)磷酸钙,它也是常见的一种沉淀物,通常会使出现浑浊,并且在 37℃ 培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点, 这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动,因此经常被误认为是微生物污染。
(3)胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是中出现沉淀物的常见原因。
Q:如何避免中沉淀物的出现?
A:首先要注意正确的解冻步骤,而且溶解过程中一定要每隔一段时间均匀而缓慢的摇动。我们已经发现在下列情况下沉淀物可能增加,使用中应该尽量避免:
(1)热灭活;
(2)在 37℃ 下培养;
(3)反复冻融;
(4)γ 射线照射;
(5)长期储存在 2-8℃;
(6)在室温下放置时间过长
Q:如何去除中的沉淀?
A:如想去除这些絮状沉淀物,可以将分装到无菌离心管中,以400g离心,上清液即可直接加入到培养基 内一起过滤。
注意:不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物,因为这可能阻塞滤膜。