细胞实验中的化学染色
1. 细胞实验中细胞经jia基绿一呱咯宁混合液处理后,其中的 DNA 和 RNA 出现不同的呈色反应,一般认为这是由于带有负电荷的核酸对碱性染料呱咯宁和jia基绿具有亲和力,且这两种染料的作用有选择性,jia基绿染高聚分子的 DNA 呈蓝绿色,呱咯宁染低聚分子的 RNA 呈红色。由此对细胞中的 DNA 和 RNA 进行定位、定性、和定量分析。经Masson染色后,胶原纤维呈现蓝色,肌纤维红色,细胞核蓝黑色。
2. 由于不同的蛋白质分子所带的碱性和酸性基团的数目不同,在 pH 值不同的溶液中,蛋白质分子所带的净电荷多少不同。如在生理条件下,整个蛋白质所带负电荷多,则为酸性蛋白质;带正电荷多,则为碱性蛋白质。据此,可将标本经三氯醋酸处理提出核酸后,用不同 pH 值的固绿染液分别染色,使细胞实验中细胞内的酸性蛋白和碱性蛋白质显示出来。神经髓鞘呈亮蓝色,背景无色至浅蓝色,主要用来显示神经髓鞘的形态结构及病理变化。
3. 过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物,用联ben胺处理标本,细胞实验中细胞内的过氧化物酶能把联ben胺氧化为蓝色的联ben胺蓝,进而变为棕色产物,因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。
4. 组织、细胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法来显示,其化学基础是利用guo碘酸的氧化作用,打开碳链形成醛,生成的醛基与 Schiff 试剂中的无色品红反应形成紫红色化合物。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍番红-固绿(骨)染色:番红O-固绿染色可直观反映关节、下的骨组织结构,呈红色,成骨呈绿色,对比鲜明,区分清晰,在关节及下骨的形态学研究中备受青睐。
嗜碱性的组织与碱性染料番红O结合呈现红色,嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上,番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质(硫酸素和硫酸角质素)成正向比例结合(离子浓度),不与胶原结合,可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的基质分布均匀一致,当受到损伤时,创伤刺激可使基质中糖蛋白立即释放活化,使基质成分发生变化,导致番红O淡染,甚至失染。通过发射电子束从而穿过超薄的样品,同时与样本相互作用,既而形成图像。固绿可与结构疏松的胶原纤维牢固结合,不宜褪色。
简要流程:石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→固绿染色→番红O染色→脱水、透明、封片(中性树胶)→番红O-固绿染(成骨呈绿色,呈红色)。南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍TUNEL染色:基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。南京英瀚斯生物科技有限公司的团队实体组建于2013年,前期以“东极生物”运营医学科研外包业务,是南京国有资产监督参股的,专注于医学科研外包服务的国家高新技术企业。 实验步骤
使细胞或组织贴在载玻片上➜固定➜洗涤➜通透➜洗涤➜预平衡➜用荧光素12-dUTP标记断裂的DNA链➜终止反应➜洗涤➜封片➜分析样品南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。
病理实验外包,病理染色胶原纤维染色法
1.Van Gieson(V.G)***-酸性品红法
鲜红色:胶原纤维
黄色:肌纤维、细胞质、红细胞
蓝褐色:胞核
2.天狼星红(Sirius red)***染色法
红色:胶原纤维
绿色:细胞核
黄色:其他
另:天狼星红***染色法:(偏光显微镜) Ⅰ型:强双折光性,呈黄色或红色纤维 Ⅱ型:弱双折光,呈多种色彩疏网状分布 Ⅲ型:弱双折光,呈绿色的细纤维 Ⅳ型:弱双折光的基膜,呈淡黄色