移液器的工作原理是活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。在活塞推动下，排出部分空气，利用大气压吸入液体，再由活塞推动空气排出液体。使用时，配合弹簧的伸缩性特点来操作，可以很好地控制移液的速度和力度。
移液器一个完整的移液循环，包括吸头安装——容量设定——吸液放液——卸去吸头等步骤。各个步骤都需要遵循操作规范。 1、容量设定 从大体积调节至小体积时，逆时针旋转至刻度即可；从小体积调节至大体积时，可先顺时针调过设定体积，再回调至设定体积，可保证较佳的准确度。 不可将调节旋钮旋出量程范围外，否则会损坏移液器内机械装置。
3.吸头浸入角度和深度：吸头浸入角度控制在倾斜20度之内，保持竖直为佳，吸头浸入深度建议如下所示：
移液器规格 吸头浸入深度
2µL和10µL 1 mm
20µL和100µL 2-3 mm
200µL和1000µL 3-6 mm
5000 µL和10mL 6-10 mm
4.吸头润洗：对常温样品，吸头润洗有助于提高准确性;但是对于高温或低温样品，吸头润洗反而降低操作准确性，请使用者特别注意。
5.吸液速度：移液操作应保持平顺、合适的吸液速度;过快的吸液速度容易造成样品进入套柄，带来活塞和密封圈的损伤以及样品的交叉污染。